革蘭氏染色法是丹麥醫(yī)生Christain Gram于1884年所發(fā)明，是細菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法，亦是一種復(fù)染法，通過此法染色可將細菌鑒別為革蘭陽性菌(G⁺)和革蘭陰性菌(G^-)兩大類。細菌的不同顯色反應(yīng)是由于細胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異，主要是肽聚糖層厚度和結(jié)構(gòu)決定的，在同樣染色環(huán)境中利用細菌不同的等電點(Gram陽性細菌等電點為pH2.0~3.0，Gram陰性細菌等電點為pH4.0~5.0)，陽性細菌帶的負電荷比陰性細菌帶的負電荷多，與帶正電荷的堿性染料如結(jié)晶紫結(jié)合較牢，再加入媒染劑(碘)進入菌體后，與染料結(jié)合形成不溶于水的結(jié)晶紫-碘-蛋白復(fù)合物，并與陽性菌菌體內(nèi)的核糖核酸鎂鹽結(jié)合，使已著色的細菌不易脫色；而分化劑(苯胺、丙酮等)不易透過陽性菌的細胞壁，故陽性菌不易退色；但分化劑容易進入陰性菌菌體內(nèi)，溶解染料和碘復(fù)合物，使陰性菌脫色。

    Leagene 改良Gram-Weigert(苯胺結(jié)晶紫法)是在經(jīng)典的革蘭染色配方進行改進，使用蘇木素和Weigert碘液加強染色，該法也是在草酸銨結(jié)晶紫法演化過來的；臨床標本直接涂片，背景干凈，胞內(nèi)吞噬體清晰易辨認，細菌染色特征典型，可以區(qū)分Gram陽性細菌和陰性細菌，尤其適用于鑒別細菌和非細菌的藍色微顆粒狀物質(zhì)(如鈣鹽)。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。